Coleta da ectocérvice:
Utiliza-se espátula de Ayres, do lado que apresenta reentrância. Encaixe a ponta mais larga da espátula no orifício externo do colo, apoiando-a firmemente, fazendo uma raspagem na mucosa ectocervical em movimento de 360º em torno do orifício cervical externo, para que toda a superfície do colo seja raspada e representada na lâmina. Deve ser exercida uma pressão firme, mas delicada, sem agredir o colo, para não prejudicar a qualidade da amostra deve-se estender o material de maneira uniforme. A amostra ectocervical deve ser disposta no sentido transversal, na metade superior da lâmina, próximo da região fosca, previamente identificada com as iniciais da mulher e o número do registro.
Coleta da endocérvice:
Recolher o material introduzido e escova endocervical e fazer um movimento giratório de 360º, percorrendo todo o contorno do orifício cervical. O material retirado da endocérvice deve ser colocado na metade inferior da lâmina, no sentido longitudinal. O esfregaço obtido deve ser imediatamente fixado para evitar o dessecamento do material. É importante observar a validade do fixador. Na fixação com álcool a 96%, considerada mundialmente como a melhor para os esfregaços citológicos, a lâmina deve ser colocada dentro do frasco com álcool em quantidade suficiente para que todo o esfregaço seja coberto, fechar o recipiente cuidadosamente e envolvê-lo com a requisição.